ПЦР на выявление вируса ветряной оспы

Varicella zoster относится к семейству вирусов герпеса. Это очень распространённое заболевание, первичная инфекция очень заразна и передаётся от человека к человеку через дыхательные пути. VZV вызывает ветряную оспу у молодых людей и взрослых, которые ранее не подвергались инфицированию. Примерно спустя 14 дней после контакта с вирусом появляется зудящая сыпь, за которой следует образование прыщеобразных папул, которые превращаются в маленькие заполненные жидкостью пузырьки (везикулы). Вскоре везикулы вскрываются, образуют корку, после чего заживают. Этот процесс происходит двумя-тремя волнами или «урожаями» из нескольких сотен везикул в течение нескольких дней.

Как только первоначальная инфекция проходит, вирус становится латентным, сохраняясь в сенсорных нервных клетках. Во время инфекции у человека вырабатываются антитела, которые обычно предотвращают повторное заражение ветряной оспой при последующих контактах. Однако у пожилых пациентов и людей с ослабленным иммунитетом VZV может реактивироваться, мигрируя вниз по нервным клеткам к коже и вызывая опоясывающий лишай (известный как опоясывающий герпес).

Наиболее специфичным и максимально чувствительным способом диагностики варицелла зостер является молекулярно-генетический ПЦР тест. В его основе лежит принцип численного увеличения количества копий характерного для возбудителя инфекции участка ДНК.

Скрининг включает ПЦР диагностику, направленную на выявление ДНК Herpes Zoster и Varicella Zoster в пробах анализируемого биоматериала. Анализ даёт возможность обнаружить вирус даже в том случае, когда его количество в организме незначительно, в частности при бессимптомной персистенции возбудителя.

VZV является этиологическим агентом ветряной оспы (varicella) и опоясывающего лишая (herpes zoster). Ветряная оспа вызывается первичной инфекцией варицелла-зостер и чаще всего встречается у детей, тогда как опоясывающий лишай образуется вследствие реактивации латентной инфекции VZV и чаще всего встречается у взрослых старше 50 лет. Вакцинация против варицелла-зостер значительно снижает заболеваемость и тяжесть инфекции.

Поскольку клиническая диагностика ветрянки сложная до момента возникновения первой симптоматики болезни, лабораторное исследование методом ПЦР успешно с этим справляется, приобретая всё большую популярность.

В отличие от культурального и серологического скринингов молекулярно-биологический тест достаточно прост. Он отличается высокой информативностью, специфичностью, быстротой выполнения. С его помощью успешно идентифицируется VZV.

Скрининг на Varicella zoster позволяет диагностировать вирус опоясывающего герпеса / ветряной оспы в активной, недавней либо давно перенесённой фазе, проверить эффективность иммунизации против возбудителя и риск реактивации VZV до введения иммунодепрессантов.

Генотипирование с помощью ПЦР эффективно для выявления вакциноспецифических штаммов VZV для выявления / подтверждения побочных реакций на вакцинацию.

Исследование показано женщинам при планировании беременности, лицам, контактирующим с зараженными людьми, новорожденным с признаками генетического инфицирования VZV, иммунодефицитной категории лиц с диагностированным воспалением головного мозга неустановленной этиологии.

Кроме того, анализ на Varicella zoster назначается при подозрении:

1. Инфицирования ветряной оспой.
2. Заражения опоясывающим лишаём (Herpes Zoster).
3. Побочных симптомов вакцинации от Varicella zoster.

Данный анализ показан и при диагностике вспышек эпидемии ветрянки, тяжёлых случаев, связанных с госпитализацией или смертью.

Бывают ситуации, когда клинические признаки сами по себе не являются подтверждающими, особенно у пациентов, получивших одну или две инъекции вакцины против VZV; в таком случае для подтверждения / исключения инфицирования ветрянкой и постановки точного диагноза рекомендуется лабораторное ПЦР-исследование на VZV.

Если у пациента наблюдаются побочные явления после плановой вакцинации, ему также может быть рекомендовано лабораторное исследование с целью выявления возможной инфекции VZV и определения того, вызваны ли осложнения вакцинным штаммом VZV.

ПЦР-тестирование является наиболее быстрым и чувствительным методом подтверждения диагноза ветряной оспы / опоясывающего герпеса. Лучшим образцом для ПЦР-анализа является ткань везикулярных поражений или струпьев (в случае их наличия). При отсутствии последних в качестве биоматериала для диагностики могут использоваться слюна или кровь, но в таком случае повышается вероятность получения ложноотрицательного результата.

Среди достоинств ПЦР-тестирования стоит выделить:

• доступность;
• точность;
• автоматизацию;
• диагностику в режиме реального времени;
• эффективность;
• простоту.

Тест успешно применяется для обнаружения вирусов herpes zoster, varicella zoster, в качестве дифференциальной диагностики (совместно с другими анализами) при подозрении энтеровирусов ECHO и Коксаки, ВПГ, поверхностной пиодермии, уртикарии, укусов различных насекомых, рабиеса, многоформной экссудативной эритемы, дерматита Дюринга, разноцветного лишая, аллергии на лекарственные препараты, вторичного сифилиса.

• при наличии необычных и/или особо серьёзных симптомов, по которым врач хочет провести различие между инфекцией VZV и иными заболеваниями;
• в случае необходимости подтверждения иммунизации к вирусу ветряной оспы;
• накануне трансплантации органов (редко);
• в целях профилактики возможного заражения VZV, когда известно, что ребенок, беременная женщина или человек с ослабленным иммунитетом подверглись воздействию вируса ветряной оспы.

Особых требований по подготовке к диагностике не предусмотрено.

С целью получения достоверного результата рекомендуется сдавать анализ по истечении 4 часов с момента последнего приёма пищи.

Забор образца для исследования должен осуществляться в чистую стерильную пробирку. Количество биоматериала должно строго соответствовать метке на пробирке.

Чтобы проба смешалась с наполнителем, сразу же по завершении забора образца биоматериала и вытаскиванию из держателя пробирки её следует несколько раз перевернуть на 180°. Встряхивать ёмкость запрещено!

ПЦР – диагностика позволяет провести исследование на такие инфекционные заболевания, как:

• ВИЧ – инфекция;
• Вирус папилломы человека (ВПЧ);
• Вирус простого герпеса.

• амниотическая жидкость;
• капиллярная или венозная кровь;
• спинномозговая жидкость или ликвор;
• слюна;
• соскоб эпидермиса.

Если человек не инфицирован вирусом простого герпеса, то результат будет отрицательным. В случае инфицирования, даже малейшие концентрации вируса в организме дадут положительный результат исследования.