Т-ЛИМФОЦИТЫ И КИТЕРГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ

Сейчас установлено, что лимфоциты, организующие- китергические (клеточные) реакции, являются тимусзависимыми (Т-лим- фоциты). Этот вид лимфоцитов организует также реакции отторжения трансплантатов.

Т-лимфоциты, как и В-лимфоциты, происходят из стволовой костномозговой клетки через промежуточную стадию ее развития, обозначаемую- как РТ-клетка, или предшественник (прекурзор) Т-лимфоцита. В аллергических реакциях участвует Т-лимфоцит, обладающий свойством оказывать вредное, убивающее клетки-мишени, действие. Эти Т-лимфоциты называются поэтому Те-лимфоцитами, или лимфоцитами-эффекторами, или «киллерами» (англ, killer — убийца).

Существуют и другие разновидности Т-лимфоцитов с другими функциями. Среди них выделены Ts или Т-супрессоры (клетки-супрессоры) и Ть, или Т-хелперы (англ, helper — помощник).

Т-хелперы являются помощниками В-лимфоцитов в процессах выработки антител. Они служат носителями рецепторов для белковой и макро- молекулярной частей антигенов и выделяют медиаторы (тимозин и др.), стимулирующие В-клетки к выработке антител.

Т-лимфоциты из костного мозга переносятся с током крови в тимус,, в котором созревают в клетки, способные отвечать на антигенное раздражение в форме усиления синтеза ДНК, размножения клетки (так называемая бласттрансформация) и выделения ряда биологически активных веществ — медиаторов клеточных аллергических реакций.

У мышей различают 3 основные субпопуляции Т-лимфоцитов. Ті-лим- фоциты (Ly-І) стимулируют выработку антител (33% популяции)_ Ti-лимфоциты содержат Tliy-І антиген, радиочувствительны. Живут в. организме несколько месяцев. Локализуются в селезенке и лимфоузлах. Тг-лимфоциты (Ly-2,3)—супрессоры, составляют 5—10% популяции, подавляют выработку антител, радиорезистеитиы, содержат мало ТЪу-1' антигена, находятся в лимфоузлах и селезенке. Живут 2—6 недель. Формируют коптактный дерматит. Т3-лимфоциты (Ly-1, 2, 3) «киллеры» (50% популяции) находятся в периферической крови, живут более 6 месяцев. Обладают агрессивным и цитотоксическим действием на клетки- мишени, организуют замедленные аллергические реакции туберкулинового типа, содержат Thy-І антиген, радиочувствительны. Генетически: все Т-субпопуляции контролируются 1а субрегионом #2-региона 17 хромосомы.

Т-лимфоциты существенно отличаются от В-лимфоцитов не только тем, что они не вырабатывают антитела, но и прежде всего тем, что они организуют аллоргичесхше реакции клеточного типа. По сравнению с В-лимфоцитами Т-лимфоциты более долго живут (ерше их жизни — месяцы, а у В-лимфоцитов — недели). Они более чем В-лимфоциты устойчивы к кортизолу, легко адсорбируют на поверхности эритроцита барана (реакция розеткообразования). Т-лимфоциты содержат на своей поверхно-

аДаниые получены в основном в экспериментах на мышах, и их экстраполяция в отношении человека сомнительна.

“Деление некоторых В-лимфоцитов может носить вторичный характер и может быть, вызвано факторами, выделяемыми стимулированными Т-лимфоцитами. В-лимфоциты могут быть стимулированы и в том случае, когда митоген связан с твердым носителем.

г3а исключением бластиых клеток.

д3а исключением зрелых плазматических клеток или тех случае», когда к В-лимфоцитам1 прикреплены иммунные комплексы.

■сти тимусспецифический антиген © [19].

Электронно-микроскопические (скеннирующие) снимки Т- и В-лимфоцитов показали существенные различия в строении их поверхности. В то время как В-лимфоциты имеют па поверхности очень большое количество маленьких ворсинок, содержащих рецепторы для антигенов, и выглядят «мохнатыми», Т-лимфоциты имеют сравнительно мало таких ворсинок-рецепторов (рис. 82). Лимфоциты способны фиксировать глобулин G и М. Отношение двух указанных классов глобулинов на поверхности В- лимфоцитов у человека составляет 1:4 или 1:1 (Williams, 1974). Т-лимфоциты содержат, кроме того, по-видимому, еще другие рецепторы, пока неизвестной природы.

Установлено, что иммуноглобулины М и G фиксируются на В- и Т- .лимфоцитах посредством Fc участков их тяжелых цепей (рис. 83). При этом у Т-лимфоцитов Fc участки тяжелых цепей глубоко входят в протоплазму лимфоцита и на поверхности его остаются лишь Fab участки тяжелых цепей и частично легкие цепи. У В-лимфоцитов Fc участки тяжелых цепей погружаются в протоплазму лимфоцита незначительно и •большая часть молекулы глобулина остается па поверхности клетки. Это и создает видимость ворсинки под электронным микроскопом. Плотность распространения рецепторов на поверхности В-лимфоцитов— 105 на клет- чгсу, а для Т-лимфоцитов — 102—103 на клетку. Существование рецепторов

в Т-лимфоцитах, отличных от В-лимфоцитов, но обнаруживаемых имму- нологячоски, показал в нашей лаборатории Н.

Характерно, что Т-лимфоциты в большей степени распознают различия белковых носителей антигенов, чем их детерминанты со свойствами гаптена. Например, Т-лимфоциты животного, иммунизированного конъюгатом дипитрофенол-альбумииом, не будут реагировать с динитрофенол- глобулипом, по легко реагируют с пикрил-альбумином. Известно, что антитела, наоборот, различают прежде всего детерминанты низкомолеку-

Рис. 83. Т-лимфоцит (слева) и В-яимфоцит с глобулинами на поверхности.

1—легкие цепи иммуноглобулина; 2 — тяжелые цепи иммуноглобулина; Гс—участок тяжелой цепи, погруженный в лимфоцит.

лярпой структуры (гаптепы) и относительно хуже различают строения белковых носителей в различных антигенах.

Удаление тимуса или введение животному иммунной сыворотки против ©-антигена Т-лимфоцитов резко снижает количество Т-лимфоцитов в •организме и угнетают реактивность по типу замедленных клеточных (китергических) реакций. Весьма важным свойством Т-лимфоцитов является их способность вызывать явление цитотоксичности, передаваемой клетками (Cell-mediated cytotoxity). Оно заключается в том, что сенсибилизированный тем или иным антигеном лимфоцит способен оказать прямое разрушающее (цитотоксическое действие) на ту или иную клет- ку-мшпенъ, содержащую (несущую) тот самый антиген, которым был сенсибилизирован лимфоцит. В качестве клеток-мишеней для экспериментальных целей используются Т-лимфоциты в стадии лимфобластов, образование которых стимулировалось фитогемагглютинином. В опытах in vitro используются в качестве клеток-мишеней также моиослойные культуры макрофагов, фибробластов и других клеток. В качестве показателей повреждения клеток-мишеней сенсибилизированными цитотоксическими лимфоцитами (GL) использовались различные методы,

Привлекает внимание использование клеток-мишеней (лимфоцитов), меченных хромом (СгБ1).

25 Общая аллергология 385

л количество сенсибилизированных лимфоцитов

щее разрушение (лизис) 7з (33%) клеток-мишеней, называют одной; литической единицей (опыты на монослойной культуре или другие конструкции in vitro) (Gerottini, Brunner, 1974).

Обычно применяют постоянное количество клеток-мишеней, например* 25Х103. В опытах на мышах для получения сенсибилизированных лимфоцитов клетки селезенки мыши одной линии (G57BL/6) вводят в организм мыши другой линии (DBA/2), предварительно облученной летально и неспособной разрушить введенные чужеродные лимфоциты. В этих условиях введенные лимфоциты сохраняются и сенсибилизируются, т. е. приобретают на своей поверхности антигенные детерминанты против тканей (лимфоцитов и др.) мыши реципиента (в приведенном примере линии DBA/2). Можно получать сенсибилизированные лимфоциты и in vitro» путем инкубации их с клетками селезенки мыши другой линии, но также предварительно облученной в дозе 800 R, которая полностью препятствует разрушению лимфоцитов в такой смешанной культуре. Указывают, что сенсибилизации Т-лимфоцитов в культуре помогает присутствие макрофагов или продуктов их обмена. Действие макрофагов рассматривается как неспецифическое. Bloom (1974) разработал метод изучения Т-лимфоцитов, основанный на приобретении этими лимфоцитами, стимулированными митогенами, способности репродуцировать вирусы (кори,, визикулярного стоматита, полно, lierpes simplex и др.) - В бласттраисфор- мированных Т-лимфоцитах вирусы размножаются и по выделению их из. лимфоцитов можно судить о принадлежности лимфоцитов к Т-типу подобно тому, как в методе Ierne судят о В-лимфоцитах на основании вызываемого ими на кровяном агаре гемолиза. О выделении вирусов из. лимфоцитов узнают по их цитопатогеиному эффекту на монослойной культуре фибробластов. По данным Bloom, стимулированные Т-лимфоци- ты через 24 ч репродуцируют вирусы в количестве 1: 1000 клеток, а через 4 дня это количество возрастает до 20: 1000. Реакция эта называется Virus plaque-forming cells (y-pFC) реакцией, или реакцией бляшко- образования. Бляшкой называют пятно, выражающее поврежденный участок культуры вирусчувствительных фибробластов в монослойной культуре.

А. X. Канчурин и В. Б. Гервазиева (1972) показали, что лимфоциты крыс с экспериментальным аллергическим энцефаломиелитом способны? оказывать цитопатическое действие на олигодендроциты в культуре мозжечка этих животных. Лимфоциты стимулировались антигенами мозга и,, по-видимому, выделяли медиаторы, вызывающие реакции замедленной аллергии,

В опытах на мышах изучены свойства Т-лимфоцитов, участвующих В'- определении 4 основных типов Т-зависимых реакций. Разные типы этих реакций определяются различными комбинациями субпопуляций Т-лимфоцитов. Так, туберкулиновый тип аллергических реакций формируется' всеми тремя основными типами Т-лимфоцитов: Т-лимфоцитами-эффекто- рами или киллерами, обозначаемыми как Тз или, по новой номенклатуре, — Ly-1, 2, 3, Т-супрессорами (Тг или Ly-2, 3), а также Т-хелперами, обозначаемыми как Ti (Ly-1). Аллергические реакции типа контактного* дерматита определяются содружественным действием Ті- и Тг-лимфоцш тов. Аутоаллергические реакции являются выражением дефицита лимфоцитов—супрессоров, а реакция отторжения трансплантата полностью* обусловлена лимфоцитами — киллерами или эффекторами: (материалы! симпозиума по лимфоцитам под ред. Cantor и Boise, 1977) ..

и в организации аллергических реакций клеточного, замедленного типа. Однако вопрос о формах этого участия еще не является окончательно решенным. Цитотоксический эффект, вызываемый лимфоцитами, специфичен в иммунологическом смысле.

Цитотоксическое действие лимфоцитов представляет собой энергетически зависимый процесс. Показано, что увеличение содержания циклического аденозип-3,5-монофосфата, в лимфоцитах снижает их цитотоксическую активность. Вещества, активирующие аденилциклазу в лимфоцитах (простагландины Ei и Ег, гистамин, изопротеренол) или тормозящие фосфодиэстеразу (теофиллин), вызывают угнетение токсичности Т- лейкоцитов, сенсибилизированных аллергенами. Холерный токсин, активирующий аденилциклазу, также тормозит цитотоксическую активность Т-лимфоцитов. Холинергические агенты вызывают противоположный эффект. Возможно, что этот эффект связан с накоплением в Т-лейкоци- тах гуалозип-3,5-монофосфата. Вероятно, энергетические процессы в Т-лим- фоцитах организуют их секреторную деятельность в смысле выделения большого числа биологически активных веществ, реализующих значительную часть токсического эффекта этих клеток.

Т-лимфоцит атакует клетку-мишень путем соприкосновения с ней через тонкую псевдоподию — уроподию. По-видимому, через этот контакт реализуется передача различных веществ, «факторов», медиаторов, оказывающих токсическое действие на клетку. Сущность токсического действия заключается в том, что клетка-мишень теряет подвижность (если она ее имела), перестает размножаться, в ней развиваются процессы дистрофии (цитопатогенное действие) и клетка разрушается.

Различают пять типов цитотоксического действия лимфоцитов (рис. 84, 1-У). Первый тип осуществляется Т-лимфоцитами, несущими рецепторы к клеткам-мишеням. После соединения с антигенами клетки лимфоцит оказывает цитотоксический эффект. Действие лимфоцитов первого типа изучают в культуре клеток-мишеней. Лимфоциты получают при иммунизации клеточными или тканевыми антигенами.

Второй и третий типы представляют собой действие лимфоцита, сенсибилизированного к растворимым макромолекулярным антигенам. Во втором типе лимфоцит при контакте с антигеном активируется, выделяет неспецифические медиаторы, вызывающие гибель клетки-мишени.

При третьем типе цитотоксического действия лимфоцита он встречается в культуре с клеткой-мишеныо, несущей на себе специфический антиген, к которому лимфоцит сенсибилизирован. После присоединения к клетке лимфоцит оказывает на нее токсическое воздействие и клетка

Пятый тип повреждающего действия лимфоцита представляет собой Рсобвхй случай. Лимфоцит присоединяется к клетке-мишени также через антитела, фиксированные на' этой клетке. Такие лимфоциты, которые предварительно не несут на Цов'ерхноСти ни антител, ни рецепторов для їйи^огейов;, .называются' .К-лимфоцитами, или нулевыми лимфоцитами. Они присоединяются к клеткам-мишеням, несущим .антитела, через Fc фрагменты молекулы IgG и оказывают неспецифическое цитотоксическое- действие. Деструкция клеток при этом специфична для покрывающих их антител. Таким образом, лимфоциты могут воздействовать на клетки, сенсибилизированные любыми антителами. Этот тип действия может иметь место при аутоаллергических процессах.

В настоящее время известно много видов медиаторов, выделяемых Т-лимфоцитамн под влиянием воздействия на них специфического антигена (аллергена). Важнейшие виды этих медиаторов представлены в таблице, составленной научной группой ВОЗ в Женеве в 1974 г. (табл, 95).

В механизме клеточных аллергических реакций имеют значение лишь некоторые медиаторы, причем ни одип из них, будучи взят в отдельности,, не способен вызвать аллергическую реакцию замедленного типа.

Введение смеси многих факторов Т-лимфоцитов в кожу нормальной морской свинки или человека вызывало пекоторое подобие аллергической реакции замедленного типа, но не представляло ее во всем ее объеме- (Bloom, 1974). Dumonde (1969) предложил для всех медиаторов замедленных реакций собирательное название «лимфокины». Среди многочисленных медиаторов Т-лимфоцитов некоторые привлекают в настоящее время впимапие с диагностической точки зрения и в связи с механизмом аллергических реакций замедленного типа.

Кожно-реактивный фактор. Освобождается из лимфоцитов туберкулезной свинки или кролика под влиянием воздействия туберкулина. Фактор неотделим пока от МИФ и других медиаторов и, по мнению некоторых ученых, является их комбинацией. Фактор представляет собой альбумин, возможно в соединении с жирными кислотами. Он остается в супернатанте после центрифугирования отмытых лейкоцитов, обработанных туберкулином. После введения супернатанта внутрикожпо здоровым свинке или кролику у животных развивается воспаление замедленного тина. Хорошим источником этого фактора являются лимфатические узлы туберкулезных животных.

Хемотаксический фактор. Супернатант от стимулированных антигеном клеток лимфатических узлов содержит фактор, вызывающий хемотаксис макрофагов. Среду, содержащую хемотаксический фактор, помещали по одну сторону микропористого фильтра, а взвесь макрофагов — по другую сторону этого фильтра. Макрофаги интенсивно мигрировали через микропористый фильтр в среду, содержащую фактор хемотаксиса (Ward, 1967). Фактор представляет собой а-глобулин или альбумин и имеет молекулярную массу около 50 000.

Бластогенный или митогенный фактор. Показано, что лимфоциты периферической крови человека или культура этих лимфоцитов после воздействия на них ППД в дозе 0,6 мг/мл выделяют в окружающую среду вещество, вызывающее бластпую трансформацию лимфоцитов. Бластогеи- ный фактор сообщает также нормальным лимфоцитам свойство цитотоксичности (Г. Н. Свет-Молдавский и др., 1970). Бластогенный фактор стимулирует поглощение тимидина в ДНК и уридииа в РНК лимфоцитов. Интересно, что бластогенный фактор был найден также в супернатанте лимфоцитов, обработанных иммунным комплексом реагин — пыльцевой аллерген.

Лимфотоксии и фактор, тормозящий пролиферацию клеток-мишеней

(ПИФ). Фактор был найден в супернатанте сенсибилизованных клеток лимфатических узлов туберкулезной морской свинки, культивируемых со специфическим антигеном. Полагают, что этот фактор имеет значение в формировании аллергического восцаления замедленного типа (Joshinage et al., 1972). Фактор имеет молекулярную массу 80 000 (у человека). Он

Биологические свойства продуктов активированных лимфоцитов (из доклада научной группы ВОЗ, Женева, 1974)

устойчив к кипячению, мигрирует в электрическом поле к глобулинам, но не является таковым. По-видимому, это полипептид. Описан и другой «фактор, тормозящий пролиферацию, который выделен у мышей. Он имеет молекулярную массу 10 000; разрушается при нагревании до 56°С.

Лимфотоксин является ингибитором пролиферации клеток в культуре (например, клеток HeLa). Действие лимфотоксического фактора Naniba и Waksman (1975) выражают через «лимфотоксический индекс», который представляет собой отношение:

Лимфотоксический фактор выделен также из нейтрофилов. В макрофаге, однако, эти вещества, по-видимому, имеют другую природу.

Фактор, тормозящий миграцию макрофагов (МИФ). Это наиболее известный медиатор замедленных клеточных реакций. Его изучают с диагностической и различными исследовательскими целями, хотя прямой роли его в патогенезе клеточных реакций замедленного типа никто пока не показал. Это гликопротеид с молекулярной массой около 60,000 для лимфоцитов человека и с молекулярной массой 25 000 для лимфоцитов морской свинки.

Общеизвестна постановка этой реакции в капилляре, содержащем клетки, миграция которых изучается (макрофаги, лимфоциты, нейтрофилы). Размножающиеся клетки «вылезают» из конца капилляра в виде «шапки». В случае торможения миграции количество «вылезших» клеток сильно сокращается или тормозится вовсе (рис. 85). Капилляр погружают в среду, содержащую фактор торможения миграции. Контрольные капилляры помещают в среды, не содержащие этого фактора.

В настоящее время получил распространение микрометод изучения торможения миграции лейкоцитов в периферической крови (Clausen, 1971) (рис. 86). Реакцию ставят в лунках желя агарозы, приготовленной на среде Дюльбеко и Игла с добавлением 10% сыворотки крови здорового

человека. Вещества, тормозящие миграцию (например, антигены, туберкулин), инкубируются предварительно в течение 1 ч со взвесью лейкоцитов (0,2 * 106 в 1 мкл). Для разливания взвеси лейкоцитов в лунках применяют специальный микрошприц, отмечающий 6 мкл взвеси в каждую лунку. В качестве контроля используют лейкоциты, не подвергавшиеся инкубации с веществами, тормозящими миграцию. Вычисляют индекс миграции, который выражается как отношение:

средняя площадь миграции с антигеном ^ средняя площадь миграции без антигена

Рис. 86. Микрометод изучения ■торможения миграции лейкоцитов (Clausen, 1971).

Лейкоциты в 3-й и 4-й лунках предварительно инкубировались со специфическим антигеном.

Фактор, тормозящий миграцию макрофагов, выделяется сенсибилизированными лимфоцитами под влиянием многих антигенов. Выделение МИФ вызывают туберкулин, белковые антигены и различные конъюгаты гаптенов с белками, бактериальные вакцины, вирусы, опухолевые антигены и др.

К медиаторам клеточных аллергических реакций относятся также интерферон, фактор стимуляции макрофагов и др. (см. табл. 95).

Много внимания изучению роли МИФ, а также других факторов аллергических реакций в патогенезе туберкулиновой аллергии уделил в пашей стране М. М. Авербах (1972, 1973).

Схематически Bloom (1974) представляет участие различных факторов в патогенезе аллергических реакций замедленного типа как ряд взаимосвязанных процессов (рис. 87). Как видно из рисунка, Т-лимфоцит, несущий на себе «память» в форме антидетерминанты к тому или иному аллергену, активируется после повторной встречи с ним в месте разрешающего введения аллергена. Активация лимфоцита сопровождается размножением популяции данного вида лимфоцита и выделением многих медиаторов аллергических реакций замедленного типа.

Эти агенты вызывают цитотоксический процесс и воспаление. В воспаленную ткань мигрируют лимфоциты и макрофаги. Возникает моно- нуклеарный инфильтрат, характерный для клеточных аллергических реакций.

АЛЛЕРГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ ТУБЕРКУЛИНОВОГО ТИПА

Рис. 87. Формы реакции лимфоцита, активированного антигеном (по Bloom, 1974).

Впервые повышенную чувствительность к туберкулину описал в 1891 г. Koch. Далее Pirquefc (1907) предложил туберкулиновую кожную пробу для оценки состояния аллергии при туберкулезе у детей и этим создал новую главу в учении об аллергии, которая развилась в дальнейшем в учение об аллергических реакциях замедленного типа.

Pirquet (1907) следующим образом описывал технику воспроизведения туберкулиновой реакции у человека; «Кожу предплечья протирают эфиром и на расстоянии 10 см друг от друга наносят 2 капли иеразведен- ного старого туберкулина Коха с помощью стеклянной палочки или’ стеклянки с капельником. После этого с помощью прививочного бора с платиновым концом, прокаленным на пламени, производят травму (царапину) кожи в середине между двумя каплями нанесенного туберкулина для контроля и далее такую же царапину наносят в местах нанесения капель туберкулина. Положительная реакция наступает через 24 ч. Краснота, наступающая после царапины, является неспецифической (травматической реакцией). Она наблюдается и на месте контроля. Специфическая’ реакция выражается в виде папулы в диаметре 5—25 мм. Папулу в .диаметре менее 5 мм я не рассматриваю как достоверную положительную. Она может возникнуть и у нетуберкулезных людей».

Появились модификации постановки туберкулиновой реакции. Например, Мого и Keller (1926) рекомендовали втирания 10% туберкулиновой мази. Было предложено много вариантов с применением различных концентраций туберкулина (П. С. Медовиков применял 0,4—-30% раствор туберкулина). В настоящее время применяют туберкулин в виде старого туберкулина Коха (АТК) или очищенный протеин-дериват туберкулина ,'(ППД) в виде 100, 25, 5 и 1% раствора (Е. И. Кочнова и др., 1963) или 100, 50, 25 и 5% раствора (Н. А. Шмелев, 1953). В свое время М. М. Ыа- •стюков (1920, 1923) разработал метод иммунизации туберкулином под контролем кожных аллергических реакций и установил некоторые правила индивидуального определения порога чувствительности к туберкулину. В дальнейшем определение внутрикожного туберкулинового титра для оценки индивидуальной чувствительности больных к туберкулину было разработано Л. М. Модель и Е. Ф. Сидельниковой (1928).

Ф. А. Михайлов и И. Г. Лемберский (1939) разработали методику ускоренного внутрикожного титрования чувствительности к туберкулину, ■ сущность которого состоит в постановке проб по Манту с возрастающими дозами туберкулина. Туберкулии-трипановая проба была предложена И. М. Фертик, Л. Ш. Либерталь, М. К. Племянниковой (1952). Прибавление к туберкулину краски способствует четкому выявлению воспалительной реакции, вызываемой туберкулином у больного. Ф. А. Михайлов

(1937) разработал туберкулин-эозинофильную пробу; по его данным, подкожное введение туберкулина у чувствительных людей вызывает ■уменьшение содержания эозинофилов в крови на 5% и более. Разработаны туберкулиновые тесты и вне организма, например туберкулиновая реакция оседания лейкоцитов по С. Ф. Широкову (1957).

Д. Л. Меерсон (1921) изучал туберкулиновую реакцию в зависимости ■от воздействия па туберкулин протеолитических ферментов. Реакцию на туберкулин он рассматривал с точки зрения интенсивности разложения туберкулина протеазами реципиента. По его мнению, слишком быстрое или слишком медленное разложение туберкулина создает в организме возможности для проявления туберкулиновой реакции в виде гинерергии или анергии.

II. Ы. Сиротинин (1937) рассматривал аллергию при туберкулезе как проявление инфекционной аллергии и отводил ой место между типичными аллергическими реакциями типа анафилактического шока и реакциями типа идиосинкразии. Р. О. Драбкина (1937) в его лаборатории подробно изучила влияние различных неспецифических факторов на течение экспериментального туберкулеза у морских свинок. Она исследовала парааллергические реакции у туберкулезных животных в плане феномена Борде. Развиваются отек кожи, гиперемия и инфильтрация ее сегментированными лейкоцитами, а также пролиферация гистиоцитов и эндотелия кровепосных капилляров. Через 48—72 ч наблюдается затихание сосудистой реакции и инфильтрации сегментоядерными лейкоцитами. В то же время резко активируется пролиферация лимфогистиоцитов и образуется туберкулоидная гранулема, содержащая иногда многоядерные гигантские клетки.

Кожная аллергическая реакция типа туберкулиновой была описана по отношению к антигенам пневмококка (Julianelle, 1930), стрептококка (Zinsser, Grirmell, 1925) и ко многим другим бактериальным антигенам. В 1945 г. Chase перенес туберкулиновую чувствительность человеку пассивно, с помощью лимфоцитов.

Туберкулиновая реакция, кроме кожи, может быть воспроизведена также в других тканях. Весьма характерной является туберкулиновая реакция конъюнктивы. Она развивается через несколько часов и достигает максимума развития через 16—48 ч после закапывания туберкулина в глаз. Известна также туберкулиновая реакция яичка. При введении туберкулина в яичко туберкулезного животного развивается резкое угнетение сперматогенеза.

До настоящего времени нет единых приемов оценки и стандартизации кожных аллергических реакций на туберкулин и другие аллергены, вызывающие аллергические реакции замедленного типа. Трудность стандартизации и оценки кожных аллергических реакций замедленного типа заключается в сложности состава и недостаточной чистоте препаратов-аллергенов, применяемых для постановки этого вида реакций. Относительно более разработан вопрос стандартизации туберкулина, по и там единого международного стандарта пока не существует. Так, в 1928 г. Организацией здравоохранения при Лиге Наций международная единица для старого туберкулина Коха была определена как такое его количество, которое вызывает не слишком сильные положительные реакции у 80—90% инфицированных туберкулезом людей. Препарат, удовлетворяющий этим требованиям, содержит 100 000 ЕД туберкулина (ТЕ) в 1 мл. В настоящее время изучаются и применяются более очищенные белковые препараты туберкулина. К ним относятся: препарат сухого очищенного туберкулина Зейберта (ППД-5), препарат туберкулина РТ-23 (Копенгаген) в фосфатном буфере с 10% глицерином и 0,5% фенолом, ППД-W (Вайбридж) в том же растворителе (Англия), препарат МТ-6 и др. Установлено, что активность этих препаратов существенно зависит от иммунологического статуса больных или животных и что разные туберкулины дают несравнимые результаты. Так, например, активность препарата ППД-W едва составляет Vs активности препарата РТ-23.

Pirquet считал, что воспалительная реакция кожи на туберкулин у туберкулезного больного зависит от токсического действия на клетки кожи продуктов реакции антиген — антитело, которые вызывают образование папулы и зоны покраснения вокруг нее. Морфологические изменения в коже при туберкулиновой реакции были описаны вскоре после' выявления клинической картины этой реакции (Daels, 1908, и др.). Гистологическое исследование папулы показало, что эпидермис кожи местами разрушен, под ним наблюдаются сгустки фибрина и полиморфноядерных лейкоцитов. В более глубоких слоях кожи появляется инфильтрация круглыми лимфоидными клетками вокруг кровеносных сосудов и волосяных фолликулов. В инфильтрате среди мононуклеарных лимфоидных клеток встречаются клетки типа эпителиоидных и гигантских. Последние формируют типичную туберкулоидную структуру, характерную для туберкулезных поражений тканей легких и других органов. Весьма характерным для туберкулинового воспаления является то, что воспалительный процесс и инфильтрация захватывают не только эпидермис и верхние* слои кожи, но всю толщу кожи и даже прилежащие слои подкожной клетчатки (рис. 89).

Весьма подробно изучены морфологические изменения кожи кролика^ при воспроизведении аллергических реакций замедленного , типа (Я. Л. Рапопорт, 1935—1937). Морфологические изменения в коже приз туберкулиновой реакции у морской свинки описаны М. М. Николаевым (1926). Наиболее характерным автор считает образование периваскуляр- лтых гранулем, состоящих из лимфогистиоцитов и гигантских многоядер- пых клеток, через 48—72 ч после нанесения туберкулина на кожу туберкулезной морской свинки.

Кожная аллергическая реакция на туберкулин у зараженной туберкулезом морской свинки представлена па рис. 89.

Подробный сравнительный морфологический анализ туберкулиновой реакции и феномена Артюса был в свое время сделан Laporte (1934).

Различия в морфологических картинах феномена Артюса и туберкулиновой реакции автор видит в различных фазах развития этих аллергических воспалений. По его данным, через 5 ч после разрешающей инъекции при феномене Артюса в подкожной клетчатке и частично в коже наблюдается фибриноидный отек, свертывающийся от фиксирующих жидкостей, «окрашивающийся в розовый цвет эозином. Эпидерма меньше подвержена изменениям, в ней только хуже красятся ядра. В некоторых местах имеются очаги иокроза: гиперацидофилия, пикноз, набухание. В этой стадии развития реакция мало отличается от туберкулиновой.

В последние часы развития феномена Артюса в коже, вокруг сосудов появляются очаги инфильтрации полинуклеарами и эозинофилами. Инфильтрация менее интенсивна, чем при туберкулиновой реакции. Резко выражена альтерация коллагеновых пучков, раздвинутых отеком. В верхних частях кожи эти пучки некротизированы.

Кровеносные сосуды окружены кольцами кровоизлияний. Некоторые сосуды некротизированы и затромбированы. Омертвевшая стейка сосудов представляет собой фибриноидную сеточку, где границы эндотелиальных клеток смазаны, ядер нет, все инфильтрировано полииуклеарами. Просветы сосудов часто содержат гиалиновые тромбы. Такие же изменения сосудистой стенки наблюдаются и в более глубоких частях подкожной клетчатки. В редких случаях все сосуды подкожной клетчатки претерпевают эти изменения. Этот некроз глубоких сосудов кожи не характерен для туберкулиновой реакции.

Через 15 дней появляется язва, покрытая фибрином, захватывающая слои дермы и эпидермы. На дне ее, в подкожной клетчатке, развивается молодая соединительная ткань типа грануляционной.

Как и при туберкулиновой реакции, при феномене Артюса наиболее интересные изменения наблюдаются в глубоком слое кожи и в подкожной клетчатке. В коже молодая соединительная ткань представлена в виде фибробластов, расположенных тяжами, спиралями, заворотами. Наблюдается интенсивное новообразование сосудов, инфильтрация лимфоцитами, моноцитами, плазмоцитами. В подкожной клетчатке гистиоцитарная реакция сопровояедается появлением эпителиоидпых и гигантских клеток— формируется «туборкулоидная структура». Стенки больших сосудов растянуты. Характерны застой, тромбоз, пролиферация эндотелия, инфильтрация полиморфноядерными лейкоцитами, новообразование капилляров.

Весьма важным выражением клеточного механизма аллергических реакций замедленного типа является так называемый цитотоксический феномен. Сущность его заключается в том, что различные агенты, способные вызывать аллергию замедленного типа, и прежде всего туберкулин, оказывают на лимфоциты сенсибилизированного животного повреждающее действие (Favour, 1957, и др.). Аналогичные данные получены при других видах бактериальной аллергии, а также при клеточной аллергии к белковым аллергенам и другим агентам. ■ '

Н. Д. Беклемишев и соавт. (1967) исследовали некоторые закономерности туберкулиновых реакций на моделях бруцеллеза, туберкулеза и кокковых инфекций. Авторы изучали в эксперименте интенсивность витальной окраски различных органов и тканей при туберкулезной и бруцеллезной аллергических реакциях. Отложение красителя в тканях одних, и тех же органов при этих реакциях было почти одинаковым. Это свидетельствует в пользу единого механизма данных реакций.