Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему: Органоспецифические ферменты и аммиак в лимфе и крови при формировании экспериментального цирроза печени
Автореферат диссертации по медицине на тему Органоспецифические ферменты и аммиак в лимфе и крови при формировании экспериментального цирроза печени
МАЙСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЗШ Р®
РОСТОВСКИЙ ОРДЕНА ДРУЖШ НАРОДОВ ИЕЩИНСШШ шкяшт
На щшах руЕОппсп
ФРОШ Вдадтар їїгорзвич
ОЕГАНОШЕЩІФИЧШШЕ ФЕРШПЬІ Н АМІАК В ЛИШВ І! КРОБїГ ПРН ФОРіИКШШГ '
зкашшшяшого щш шшзт .
14.00.16 - Патолопгозская фзаиакогая
АВТОРЕФЕРАТ дасоертадаи ка совскашіо учзной отепокп кандидата шдацшіснтс наук
Ростов - на - Дощг
Работа выполнена в Волгоградской ордена Трудового Краевого Заашни кядшинакоы институте , .
Научный руководитель доктор медицинских наук,профессор Н.в.ЯКШШ0
Офдаалыше сшовааты: доктор медищшшис наук.профаооор И.Ц,ШНЙЕБАЕВ
доктор медицинских ьдук,
отарди* научны! сотрудаак Ю<,Е.Б0ЩШЗЭ
Ведукая органиыадяя - Шаковокая медицинская акедеиш . им.Сеченова
Залита соотоится "■& " 1992 в /0 часов ва
оаседаняа споцвалиаироваааого совета К 064.53.03 ара Ростовско: орлеца Друкбы народов ыадшвшокои институте (344718, г. Роотов-ий--Доду» пер .Наха ча вансккй, 29),
С диссертацией исишо оанакошться в библиотеке Ростовг-.ого ордена Дружбы народов медицинском ивоти7уто.
Автореферат разослан " 1992 г
Учений секретарь специализированного совета, доцент
]. j ОБЩ ХАРАКТЕРИСТИКА РЛГО'Ш.
■ - -h ктупльност7» работ». 2аболепштл печет защитит аупосгввшюа зто среди причин нетрудоспособности it смертности.В настоящее оая отмочаотся тенденция к рооту заболеваемости остріші а xpoim
скп/,зі формага поранення почсииІ:.Ьіюурова И.Д.#19Ь9)«
Соцкальио-эколошческую знашгмосгь хронических заболаванзШ чоня подчерісіївавт далкш ВОЗ,согласно когорш болезіт печеш как ичпяа смертности насоленая зсгаого пара,стоит мп-0 глзстс.В свя-
о этим в настоящее ззрекл улолдстся (іолшоо ткгшяа пзучотга хашізков разшшш патологических процессов в почепи й разработка тогеиетическнх методов лочєшія(Лопшов Л,С„;I'.:17^XASAIIOD А,И.» ВБрУлноурлв Х.Хо,19Ь7),
Поражение почепп сопровоглается транспортом оргшюспещі^пчес-X фермонтоп ц продуктов МОТОбОЛПЗлЯ ИЗ ГГ0ЧСІШ ДПуг.їІ путяга!о от* кашей лимрой и о кропьи.В ітстоггчоо врс."л доказано,что бшшру-»
. и келчшо кпелотн при желтухах поступапт пз почепл d лшіу&а пою- а к ровь(А&ьо^оп <хй., I9GS * Dumont А.ё.^ЭЬЭ), '
ют’ся дашшэ о спещкТптаостл транспорта различных соодонешШ из ігаїюз для ликЗД и проси (Проиоаг.о 11^-5**1307)* •
Всмества^транспортируемиз лпфой и кропьп от органовtдоставил ся В -СНСТОІЯШІІ кровотоке Опродолоиио СоДОрШШШ г ПОрйфйрЯ-іскоіі крош продуктов дяскотабодизт пвчеіш*а:.пліака»мочвЕЩЗД я U пмост паяиоо ^палато дач диагностгая степешГипест# ворано» ія: печогаї.Однако необходимо ушітавать^что при прохоздеїшй по тї&тігеесюш путям я кроізепоешгм цутш^прі циркуляция йо г-йЛоі.®-ру*-у ісроЕообралсп:ш5содсргл!Шо транспортируемых пешоств ttoze?
ііачитольно пзм.залті-сяОТсзлоз И.Б» #І97І,Арчаков АЛГ. ,1975) ай,
» . • гой связи активность н концентрация различии* еоадййейяй й йеря-
орическол венозной кро|ій можете йе отражать стенеііа ДОражещій Ш--
енхиш печени.Исходя и]і отого рйеобходшл в;;бор иіі'ТіортТввйнд Йо-
кааагелей двд диагностики тяяеоти поразення печная а контроля а аффвктишоотиа проводацой терапии, -
‘В шоледаер время в патогенезе айтологячестх процессов да иоо иесто отводатоя увеличению концентрации ионов Са^+ в клетке Блюгер' А.Ф^КШ^Ї,Владимиров и.А0Д9В9) .При этом изменение прої» цаеыооти ДНЯ 91рХ ионов клеточных меыбраи при повреждении носат ундвероалшій характер.Поэтоцу представляется логичниы провеотн експерименте терапию пораяеіиііі печоїиі препараташ,вяшшітіяі на ■ над кадыщя в клетке. ,
. Целью ш?оты яваяооь определение роли лдшТи в -кроил в тран порте органоопещфічвских (Т«ршнтов, адагаака, моччвяиш а МЦА при токоичеоком поражении печонн разног степени тлаестдра таксе оцо: ка вдшшал ентагошотов кальция финопщт. в втацкэина на раэвли поражения гепатодитов.
Определить роль печеночной лим£и в крови в транспорте сргано опеца^ичесюа фврмащов,аммшх&,мочевины в ЭДА при токсической і раяеряи печени разной тяхеотя,
2. Определять роль кишечної! линфы и мезентериальной крош в тра аоріе органоодеди^ическнх 4ермевтов,алшшш,ыочевшш « «ЩА пра токсическом аор&яешш печени разно!» тядеотн.
8* Определить роль грудного протока в транспорте орга. оспецвфич оквх ферментов ,атішш, мочевины в ,Ш при токсичссном поражении печеїш разной тякроти* .
4. ^Определить отепень оіравения кровьо Йедрешюй вени изменешхА
о одержання органоойецифичвокшс ф^шентов печеїш п МДА в. гепатоц тех при токсячеоком поралении печени разной тяжести. бі Показать влияние интагониотов кальция фшоптиш и отацаашш ртепень нарушения отрукхур гепа-гощтл.а токяе иэмонение содеря ния органоспе; д<$йчески^ ферментов,мочевшш в %\ЗіЛ при токсичбскс поражении печаті.
В раїЗото впервые проведены исследования по определению аіетявнооти печеночных ферментов в оргшіноіі ЛЯМфв печеш в пииочзшка ,в лнмфе ІБ и в крови,в нормо и прп экспериментальном ПОргіШШИ печени; Проведена оценка их информативности для диагностики оотрогр и хронического поранения печеш по знзимограша поришсряческой кровя®
У становлено, что определение активности адалазы в гепатоцнтох яв. ■ • і ляегея новым чувствительным тестом токсического поразе/шя печеіи.
Бпориіо установлено,что лекаротвЬпіше-препараті? опнонтнн и отацнз'
оин обладает гепатопрогеїстішним действием, .
Практическая ііснность. Получешше ношю лшише о транспорте
органосяєцшіячосшіх фер;: літов, алміога, мочевшщ л !ДДД печеночной
Я КИШСЧІІОД Л1ІЇЯЇОІІ И провыв П]Й! токспческом П0раі:0ШШ ПОЧОіП! рао-
.иряпг гіредставлеїшя о патогенезе токсического пораяетія почогш.
Разработан новіл'1 способ определения активности супщшатдо-
цинатдегидрогенази")» Получены повне ший з об ніі'їюркатшшостп
оргаиоспецафачесішх ферментов при опродолешт (їх в псрагферзческоЗ
кровя для днапіостпгаї порахення вечпнл. ‘ • .
■ Разработан нови» чувствительный тест токсического пораленпя
лочсшіІИзоброгснпе-авторскоо свидетельство І6У6376 от 22р06й9Х
"Способ определения токсичности ХШ.51ЧЄСШІХ веществ")« . ■ . .
Продложп новый подход в лечения ТОКСЛЧ"С1Ш»- поврездйпЙ Ее—
чеки 'лекарственны?® препаратам іТшоптнном л этодазгаюм і
І а. Формирование окспериыенгального цирроза печени характеризуется особеиноотяш транспорта •органосіїецяфіЧескак фортеитов рйШЗёйй^ мочевины и Ш 6 лшфой и дровью^оттекапшми от печеш а кййечшка. %. Транспорт .гадкой частей лим£ы а содерзагщрсся в ней органосаещі«-: фіческих ферментов, аммийка,мочевина и МЕД «горез грудной йреййк ха<*
растеризовался аакономорностлю!,различии; bi дня (1 и >Т,;уш экспериментального предцирроза и ццрроза печениР
3. Дяя r^aruoo*raiaj остроЯ u xpoiuiutscuo/i форм пора ;ешш печеш! наиболее шь][юрдатищш opraHOcii-UiiiJiivecjciio (Тюршнги.оирслс-чяо^ше в периферической крова. ‘
-4. Сочетанное пришивные алтаго1шстои кальция ншшьтся эОДяктивниы для протекции токшчосшро норааеная яевиш,
Ыатсриали исследования долазспи на -1L*,-16(ГДЮ, Г.-‘Л ЬюучиоЛ оеосш Яолгогрядского шдшмшекого иаотптута.ни X научно;! кои-рероицяи молодых учешле-медиков и врачоК .лэл roi'f адского модтшнекого шштнту-tra(I98U),na I Маздународноы конгрессе иито<1«зиологовШ91). По материалам диссертации опубликовано^ нечатиих работ.
Объем я структура диссертации. Дисоорхация цзло :сна na 113 отр-'Ш-цах шшанописного т ската, шшьстри рошта Щ таблице. ч 5 рисункшли. Работа состоят из вве,псшшЛ1>ех гдаьнило.'лшл полученных роэульта-ГОП, О0ОУ7У1О1Ш ,Ш1)ОДОЪ. Список литературы вклочнот 238 иСГОЧ1ШЦ!!3 mix IS3 отечоствешшх и 09 шюотршиии. ,
■ „ Л'ГЕРИАди и шгода исаадовАННя. •
бкоперашпты выполлони па 77 берпородиих собагхщ обоего пола маооой от б до 22 кг,90 лабораторных крнсах-сащих шоооИ 200-220Г, 200 лабораторних мишшс mocoii 20 г под лслбутапошм наркозом в до-ае 40 кг/кг массц. '
Ли&*1*у аояучаян через еживлошшо в лил»1отичосг.ио сосуда поли-отилоноэыо катетори.Кровь добирали шчищеи.Стабшишаторогл служил 1,34$ раотвор окоалата натрия в развидешш-1:0.
Иорояешо почош i.>. даитрошиа. пшена ом чотироххдорнстого углерода ХЩ иодкожио два раза в надел.') по 0,0 ил/кг «^.си анвотного в ряде 50# шеляного раствора (liar,шли С.Л. н др.,1мЬУ).
Кусочки. тказш печеЫ подвергали гистологическому исследована» с окраскоЛ их rt>№ioun>vii$i
it03inmi и разрушай в гомогенизатора
рп 4°С,подвергал затем цолтрк^іутіїропшіпп.Надосаііочнуп жплкооть опользоізали в качества источника 'І^сртітов. •
Наиболее судекватшаді задачам п ноли исслодо'отіггя оказались л едущие метод» определения послолуог/ых покаапталеі1:пктишіооть пстидази и урокалиназы!Яуробіш В,Л.,ІУ7О)0штшіость ацилази( алпов И.Ю. и др.ДУОО^тіірозішагаїїотраисдагазіНТЛТ^/а-тйпІб^опг^ [)6і)в модификации Левина 1>„Б „ (ІУ69Ісуіашімгдеггідрогеиази СДГ по новь разработанному методу о исполг.эовашом п-китрстотразолшт лор;їстпго,актіївнгогь агяшотрансфорга ЛяЛГ іі ЛоЛТ о ііомощья небо- . ое кйютест"0|ллопиим с'лепмпч , крови(Зо<'
ллли О.М.,Абдулаев Г.'Ч,11'ВО). и сглзп о оти^бпохытчоскне по-азптелл,определяемые в бедренной кро<и< ,и,гут бип. в [Д? !чноЛ гопэ1Ш информативны, Тпи^актнпносл- глстидоэи л кроил бодрояноЛ они. при разг'тии ОГ била вшно.чом у "оптрол 1-нп.'\ квотных. П ог-лчив от гистиддэ«,урошш]!ааи обпару-ут-чиаст р г.роин пьорвне пря
Г. При ПрОДЦЯррОЗС И ЦИрроЗО ПСЧОШ ДКТНЬИОС’П. урокаици&рч.в кро-
Содержание амяюка в бедренной хзеиоэяок! чроьи по моро раз ли- , > * ия пора.юш1л печени возрастало,а «очошищ сннглтесь, Уровень 1.ЛЛ бедренной крови при ОГ и ХГ пряк-гичваа! не рпл»'([т1ся от значений' онтролмюИ грушш. При продаиррозо И циррозе НОЧС1Ш уровень ГАДА ИЛ 1ШЖО»ЧСМ у КОНТРОЛЬНЫХ гН’’0ГНПХ,'!Т0,ОЧ0ГИД1Ю,0<!ъЛйНлС'ГСП УСЙГ ■ :о!шом распада зтнх продуктов йцтискиелптсльщм! системами легких АрадШ1 А.И.,1975^. В пользу итого Говорит и тог <Гшг,чтЬ продук** и ПОЛ преимущественно тра!!сгюрт11>юсглйсь п систтпй кровоток ишиатической опстекой. 4 ' . ’ ’
Таким образом,сопоставление полученных даиннх позолот еде- -ють саяявчегше,что,если при ОГ ля'ТорттившУ показателем ч бодренной вепоэноЛ крови является активность гасидази.то при Л1»-гредщфрозо я циррозе п6'ге1Ш-лктавность гастйддзн и урокшшгазн; ■ )продсле!шо концентрации Iокшака п мочой..ш в бодренной венозной ^ОЕИ ш-сет являться дополнительный диагностическим критерием по-
равения почепи. Онределоіше уровня ?Щ в перш^српчсокой крови ив
является информативным показателем. . , , ,
1 Обнаруженное ншл изменения ’тсслсдуошк показателей каїс в г
патоцитах,так и в лимфо я крови,требуют корроісцші вшгалешшх кар;
юеняіі. Одним йз таких возмоанмх Кіегедоп,очоиі.чііо,• :о;:ст являться
ков Р;Т.,І982,Щидаорл М.Д.,1962 ц др.).
. Однако в данном олучао прадставляетая болео интересным прові
- денне лбчоішя леїшротвєшшиї препараташ,позлеГ.стсуніиіми на геїш-
тйшіт,а не на ранспг о? образовавшихся токсических вс'ноств.Б ка-
‘чвотвв таких срадсти біті и спитані; лозшретвезишо препарати, влшв>
*’щйє на обмой Са^+ » клетної фшоптшГ » ^тацнзни). Зыбор данной гро
пи веществ для кочення основшялсл на уннварсалыюм поиреждаиде.
деіісгшиї огкх ионов на клспсу( Владаї/мров
ДоНшо о провбдешь. аксперишітольноЛ терли і.ч при остром поі
реждешіи пачеїш предг имени в табл,3. -
Из таблшда шдно.чт у кнвотних 2-оП ' рупии,получавших толы
ЧХУ.активность фзртітов в гомогенате и сиворотко крошра токзе
.уровень .’Щ,достоверно отлнчпллеь от контрольних зітчеішн.
Использование для лечения альфа-токг 'ерола, » 3-сіі грушо ли-
вотных'ноісазало недостаточную эффективность отого ії> вещества,гак
как изменения касалисі гайко показателей голюгстігов їйиш тчзі
и не затрагивали оьшороткГ іфоши
'£иротниє Ф-ой группы долучали финонтин.Прн отой изменения аг
тивности іфегмантов и уровня І.ЩА в Г омогенатох ткани печзкн п в
оіторотко крови’'косили достоверный характер,что свидетельствует о
гепатопро.тективном к.антиоксиданті»ом-деЛствш! отого вещества.
оі групші получали эгацизил. Бри атом изменения 1 Шстивнооти адалазы.АлЛ* р гзістядазн біші достоверны. Вира-кеннос%ъ эгях иэменаний по сравнері: ' с анвотпыш 4 грунті опта' более знача
МО Л, ЧТО* ПОЗВОЛЯвТ говорить О более ОШШЮМ гепат 01 і рОТОІСТИВЧС • I действии этащшша. • ,
2ИВ0Т1Ш0 &-І1 группн ПОДучаЛН фШОПТЯП и зтацнзин. Зр» ЭТОМ изменения пктнвяоотл фершмтов и уровня МДА біті достоверны. Цифровые ‘эначен.*.і иоолодуе,’их показателе І бита наиболее близкими к ерк^с і ■ ’ • 1 ровшл значениям контрольной группы лхвогдю.»Гл,о позволило сделать
заключение о более оффективнон пршгапешш (ршогшлш в сочотшсш о , этаказином,чем иепользовсляо этих лекаротвешшх препаратов в отдоль-ности; 1 . .
, Данные о применении фшогтшіа и отадлэшия ири хрокпчеакоы по- ; разешт печени иредогозлеш» в тайл. 4 . .
Из таблицы видно,что у «щоотшх 2 группы,кого^м мог ’лея ЧХУ, активность всех ферментов в гомогенатах ткпнеИ ноченн снизалась, ..а . исключением ТАТ,что,очошідао,модяо объяснить шетн.'кад» 1 процесса обмена тирозина! ІЬнчарова Л.В.,138£). Уровень ДЦЛ у крыо 2 группн такзе достоверно возрастал. -
7 дивотішх 3 группы,по оравноіито об 2оП г^то^и,активность’ ацилазиг,таотпдазн,уроіаишіази достоверно возрастало,а ТАТ,№,обо-рот,достоверно снияалаоь. Уровень ІЩ Сня на ЗДЗ вше,чаи во 2 іруя-п еІР>б.о$). .
' Результати |иослодовалк/< активносте ортшіоспоїшфічееких ферментов печь.ш, содержания ИДА и іючєеяш б ешюротко крова крЫо продета леїш в табл.4. : ,
ИЭ таблицы| видно, чхо у яивотиых 2 группы в выворотке крови от
мечалооь достоверное увеличений актншоота аг,многранофбраз,гиотп--дазы и уроканиназы по сравнению о контролем,. Увеличении активности изучаемых ферментов в крови у шштшх 2 Тугіші, очевидно,так же- ‘ как я пря остром повреждении печени ЧХУ ^связано с повреадониеммеї^ брап гепатоцятов(Елюгер1А..Ф. а др.Д902), Обдерсханив їлочє^инн и ГЩ •было ниже і чем' в контрол^ і ‘
Сопо. гавяешіс результатов 2 и 3 групи показало достоверное уменьшение. активности амінотрансфераз « у рока;і: п; азі:. Активное т ь гис-•гадазг Зика на ','ДЛ-па ІС$ іщ.-с.чсн по 2 группе (Р^ 0.05),
Содержание мочешіш Ь 3 группе Оііпо достоверно ічгао.
' Таким образом,получениие рсзулкгати позволг.: >т предположить,что проводимая терашя способствует стабилизации мембран гепатоцитозз и препятствует віаоду специфических белков-онзнцов в кровь. За счет стабилизации мек^-ш щтоховдриіі нормализуется - синтез из аммиака мочепшш (Лсшшдоер А»,І1)85І, Получешше далішс позволяет говорить
о том,что применение ()іішопгшіа и отадазшіа при повреждения печенл таг обладаю пологктолышм -.■дактом.
1. Динлдака токсического пора :еішя пече характеризуется особенное тями транспорта форментоп нз печеніїггнстидаза при всох Торт,ах по-■рагешш почепи трсиїсіюрпюустсл >ісі:ггк>'-а;'гсліно оттекшмей кровью; урокашшаза при остром гепатите'поступает только в лт%,в гфоди появляется при хрошічосно. гепатите,при зтом активность фермента в лжфз ко морс трастатіл тякссти процесса хроничпскніі гепатит0пред-щірроз и цирроз печенл увеличивается,а в кропи сиіряетсл,
2. Транспорт ошлака.мочовини п .','ДЛ при всех Нормах поранення характеризуется одноаремеїши;.! уве.и:чошісм киїщоптіхшп аммиака в от-
текащеіі лиьфі и кров;: с преобладанием а ;шмїс; паралельним снгже-
:шем мочевины в лшфз и крмш и сои-шеїмем уровня І.И1Л в лимфо при цепзмзкноП концентрации в крови.
Б. Транспорт ферментов ’кишечної; лш*ІоП и крошлі щш токсическом поралігиш пзчсіш разной степени тгиеоги характеризуется отсутствием активности гиотвдази» первоначалыш;.! появлением активности уро-каниназн при хроническом гепатите одновременно в ят.ф п крови с ■п9слвдуадяй'ііараоішшеЦ при предциррозо и циррозе.
4; 'Транспорт аммиака,мочевины и ЬЩД из кишечшка при всех фор.’,ах
пораяеніїя печени характеризуется большим увеличена м концентрации а;.тмиака и /ЛИЛ. п лин]''» по сравнении о кровьп